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接种物的准备

? 根据"警告及注意"一栏所列方法打开一安瓿 API 悬浮培养基 (2mL)或使用 2mL 不含添加物的蒸馏水。

? 用棉签收集已接好种的平板的培养物。

? 制得浊度大于 4 个麦氏标准单位的浓菌悬液。该菌悬液制备好后必须立即使用。

试条的接种

? 在试条的前一半( VP 至 ADH 测试)，用无菌吸管接种该菌悬液，避免产生气泡(将试验条向前稍倾斜，并将

吸管顶部靠至小管内缘加液体)：

- VP 到 LAP 的试验： 每管加入约 100 µL 菌悬液。

- 对于 ADH 试验：只充满管的部分

? 在试条的后一半 ( RIB 至 GLYG 测试)：

- 根据"警告及注意"一栏所列方法打开一安瓿 API GP 培养基并转入剩下的菌悬液 (约 0.5mL) ，充分均匀。

- 这个新的菌悬液只接种到管的部分。

? 用矿物油覆盖在带下划线的试验(ADH 至 GLYG)的杯的部分，形成一个凸面。

? 盖上盖子。

? 36°C ± 2°C 培养 4- - 4 ?小时得到第一次结果，如需要，可在 24 小时(± 2 小时)读取第二次结果。

试条判读

经 4 小时孵育后：

? 加入附加试剂：

- VP 试验：各加 1 滴 VP 1 和 VP 2.。

- HIP 试验： 加 2 滴 NIN。

- PYRA, ?GAL, ?GUR, ?GAL, PAL and LAP 试验：各加 1 滴 ZYM A 和 ZYM B（*）。

*建议在使用前控制每个 ZYM B 安瓿。

为了消除任何缺陷试剂，建议按照质控章节所述应用 ATCC®

700400 菌株进行质量控制检测。

? 等待 10 分钟，参照读表读其反应结果。如需要，暴露试验条于强光下（1000 W 灯泡 10 秒），使 PYRA 到 LAP

管内多余试剂脱色。

如遇下属情况须重新孵育：

- 分辨力很低。

- 数值图谱难以接受或者可疑